稻米直鏈淀粉含量檢測的操作方法

在測定直鏈淀粉含量的實(shí)踐中,其關(guān)鍵步驟在于淀粉的溶解,而淀粉的溶解受多種因素影響,如樣品易粘結(jié)成團(tuán)、容器壁殘留樣品、水浴時間與溫度的一致性等,從而影響測定結(jié)果的重復(fù)性和準(zhǔn)確性。采用標(biāo)準(zhǔn)法測定時,樣品量大,很難控制水浴條件的一致性;體積大,不易操作,在酒精分散時易將樣品粘留在容量瓶壁上,容易產(chǎn)生誤差;過程復(fù)雜,需大量的蒸餾水和較多的其他實(shí)驗(yàn)藥品等。與之比較,簡易法不僅簡化了步驟,重復(fù)性好,節(jié)省了藥品,更為主要的是用試管架1次可同時沸水浴80個樣品,保證樣品間水浴溫度和時間的一致,提高了準(zhǔn)確性,兩人1d可完成 160多個樣品的分析測定,顯著提高了工作效率。因此, 簡易法不僅測定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)法高度正相關(guān),也表現(xiàn)出簡單、、準(zhǔn)確,節(jié)省樣品和藥品等優(yōu)點(diǎn)。因此,育種實(shí)踐中,可采用簡易法對育種早世代大群體或小樣品進(jìn)行直鏈淀粉含量的篩選測定。

不同的測定人員在不同時間采用標(biāo)準(zhǔn)法構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線,由于過程復(fù)雜和條件難以控制,一般易出現(xiàn)較大的偏差,每次必須單獨(dú)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線;采用簡易法建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線相互平行,直鏈淀粉含量誤差小于2% 。因此,該法建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線可供以后測定人員反復(fù)使用,無需每次建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,減少了工作量。由此可見,技術(shù)要求低和易操作性是簡易法另一大特點(diǎn)。

水稻胚乳含70%~80%的淀粉,其中直鏈淀粉含量的變異為0%~33%。稻米的加工、蒸煮、食味品質(zhì)以及淀粉的糊化、膨脹、粘稠、可溶、消化和抗性等淀粉品質(zhì)的形成與zui終用途均與直鏈淀粉含量和直鏈 P支鏈淀粉的比例有關(guān)。因此,直鏈淀粉含量一直是重要的水稻品質(zhì)育種目標(biāo)之一。在育種實(shí)踐中,雖已報道了一些快速測定直鏈淀粉含量的方法,但不是測定時間太長,就是不夠準(zhǔn)確和穩(wěn)定。現(xiàn)行的農(nóng)業(yè)部米質(zhì)測定方法(NY147-88),由于存在體積大和不易操作的問題,不便于育種實(shí)際利用。因此,為在育種實(shí)踐中能準(zhǔn)確、快速、的測定大量單株或高代品系的直鏈淀粉含量,在農(nóng)業(yè)部部標(biāo)方法的基礎(chǔ)上,我們進(jìn)行了簡化測定方法的研究。

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